Методика ВЭЖХ-анализа для определения розавина в корневищах родиолы розовой

Как написано в книге

Раздел "Количественное определение". Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл, приливают 30 мл 70% этилового спирта и взвешивают на тарирных весах с точностью до ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры колбу взвешивают, доводят ее содержимое 70% этиловым спиртом до первоначальной массы, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр (красная полоса) (испытуемый раствор А). К 5 мл раствора А прибавляют 5 мл воды очищенной и перемешивают. 2 мкл полученного раствора вводят в хроматограф "Милихром-5" с УФ-детектором. Хроматографируют на колонке КАХ (2 х 64 мм, сталь) по ТУ 257405.003-86, стационарная фаза "Separon С-18" (Tessek, Чехия), 5 мкм, эффективность не менее 4500 т.т. Подвижная фаза: 33 % (по объему) водный метиловый спирт или смесь: спирт 95 % — вода (2:8) с добавлением 2 % ледяной уксусной кислоты. Проводят УФ-детектирование при длине волны 252 нм, диапазон чувствительности 0.8. Скорость потока 100 мкл/мин, объем прокачиваемого элюента — 2000 мкл. Проводят не менее 5 параллельных определений. Параллельно проводят опыт с ГСО розавина. К 1 мл раствора ГСО розавина (раствор А) прибавляют 1 мл воды дистиллированной и перемешивают. 2 мкл полученного раствора хроматографируют как описано выше. Проводят пять определений высоты пика ГСО розавина и рассчитывают среднюю высоту пика по результатам пяти определений. Определяют время выхода и идентифицируют пик розавина на хроматограмме испытуемого раствора. Измеряют высоту пика розавина на хроматограмме и рассчитывают среднюю высоту пика по пяти параллельным определениям. Содержание розавина в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле: " _ м х й х30х2х 0,002x100x100 ~~ ихйх 25x0,002х2х (100-РГ) ' ГДе где mO — масса СО розавина в граммах; m — масса сырья в граммах; HO — высота пика СО розавина в миллиметрах; H — высота пика розавина в испытуемом растворе в миллиметрах; W — потеря в массе при высушивании сырья, в процентах.

Куркин В.А. Родиола розовая — золотой корень, 2015, стр. 115